생의학 연구 그룹의 사사키 아키라 (Sasaki Akira)의 연구원 생물 의학 연구 부서 [연구 부서, 오 미타 카츠 히로 (Omitani Katsuhiro), 국립 선진 산업 과학 기술 연구소 (National Research Institute) (국립 연구소) (이하 "AIST"), 생의학 연구 그룹, Kaneshiro Masataka, Kaneshiro Masataka, Kaneshivence University, Hokkaid University (국립 대학), 국립 대학교 (National University), 국제 대학교 (National University), 국제 대학교 (National University), 국제 대학교 (Cational University), 국립 대학교 (Cational University), 국제 대학교 (National University)의 생명 의학 연구 그룹 Riken Research Institute (Matsumoto Hiroshi 국립 연구소)의 Life Systems Research Center의 Takashi는 로투스 바카라가 실시간으로 살아있는 세포로 분해되는 메커니즘을 시각화하는 기술을 개발했으며 로투스 바카라 분해 활성이 세포 유형에 따라 처음으로 다른 것을 발견했습니다
이번에는 단일 분자 영상 방법으로 계산됩니다래스터 이미지 상호 상관 분광법 (CCRICS)의 원칙을 사용하여 한 번에 많은 시간 경과 현미경 이미지를 분석하여 비디오로 만들어주는 프로그램을 개발했습니다 이 기술은 살아있는 세포 공간에서 분해되는 로투스 바카라를 시각화하는 데 사용되었으며, 외래 로투스 바카라에 대한 방어 메커니즘으로 작용하는 분해 로투스 바카라의 활성은 세포마다 다르다는 것을 밝혀냈다 세포 내 로투스 바카라 분해 메커니즘이 설명된다Gene Therapy・핵산 약물의 약물 발견 설계에 대한 논리적 백본을 제공 할 것으로 예상됩니다 분자 메커니즘에 기초한 약물 발견을 가속화한다 결과는 2015 년 9 월 24 일에 게시되었습니다과학 보고서잡지에 게시 (디지털 버전, Open Access)
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| 개발 된 CCRICS 분석 방법을 사용한 로투스 바카라 분해 시각화 개요 |
유전자 요법 및 핵산 약물이 최근에 주목을 받고 있습니다 특히, 임의의 유전자 정보를 세포에 통합하는 로투스 바카라를 인위적으로 도입하는 기술 (유전자 소개)의 개발은 가치가 있습니다 그러나, 외국 로투스 바카라가 세포로 들어간 후에는 블랙 박스이며, 반복적 인 시행 착오를 통해 기술 개발이 수행되었습니다
논리적 설계에 기초한 약물 발견 연구를 진행하기 위해, 세포 내 로투스 바카라의 운명을 아는 것이 필수적이지만, 현재의 일반적인 기술은 분자 수준에서 세포 내에서 변화하는 로투스 바카라의 역학을 정량화하기에 충분히 달성되지 않았다
AIST는 생물학적 분자 및 세포의 기능을 이해하고 설명하기 위해 새로운 약물 발견 기본 기술의 개발을 촉진하고있다 유전자 발현 및 단백질 상호 작용, 살아있는 세포에서 유전자 발현 및 단백질 상호 작용과 같은 비 침습성 단일 분자 분자 사건이 유전자 발현 및 단백질 상호 작용을 해석 할 수있는 기술을 개발하는 것은 매우 어렵지만 Hokkaido University와 협력하여 Raster Image Cross-Acrelation Spectroscopy (래스터 이미지 상호 상관 분광법; ccrics)를 사용하여 세포 내 로투스 바카라 분해를 정량화하는 방법을 개발 하여이 연구의 결과로 이어졌습니다
이 연구 개발은 일본 과학, 과학 및 기술 홍보를 위해 일본 사회가 자금을 지원하는 Young Research B의 지원으로 수행되었습니다
이 기술은 살아있는 세포에서 동적으로 진행되는 수명 현상 인 "외국 로투스 바카라의 저하"를 시각화하는 방법을 고안하고, 공간에서 분해 된 로투스 바카라의 비율 및 분해 속도를 비디오를 통해 관찰 할 수있는 분석 방법의 개발로 이어졌습니다 세포로의 유전자 전달은 유전자 요법 및 핵산 약물의 기초를 형성하는 기본 기술입니다 도입 된 로투스 바카라는 기능을 유지하면서 기능 부위에 도달해야하지만, 외래 로투스 바카라에 대한 세포의 방어 메커니즘에 의해 분해되는 것으로 생각된다
도 1은 유전자 전달의 일반적인 메커니즘과 우리 가이 시간에 초점을 둔 세포질의 분해를 보여준다
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| 그림 1 유전자 전달 및 기술 개발의 메커니즘 |
| 로투스 바카라가 분해되었는지 여부를 결정하기 위해, 도입 된 외래 로투스 바카라 (30베이스 쌍)에 2 개의 형광 염료로 표지되었다 CCRICS는 분자의 운동을 관찰하고 두 색상의 형광 신호가 동시에 또는 별도로 변동하는지 여부를 분석함으로써 2- 색 형광 염료, 즉 로투스 바카라의 분해를 검출 할 수있다 또한, 다수의 시간 경과 이미지를 대량으로 처리하는 프로그램을 개발함으로써 감지 된 로투스 바카라의 비디오 분해를 만들 수있게되었습니다 이 연구 주제는 다음과 같습니다MEF 세포및HEK293 세포사용되었습니다 MEF 세포는 유전자 전달에 효율적이지 않으며, HEK293은 유전자 전달에 의해 단백질을 쉽게 발현하기 쉬운 세포로 알려져있다 우리는 이러한 효율의 차이가 세포 내 로투스 바카라 분해 활성을 포함한다고 가정했다 |
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| 그림 2 살아있는 세포에서 로투스 바카라 분해 활성의 관찰 (도입 후 42 분) |
제조 된 형광 표지 된 로투스 바카라는 MEF 세포 및 HEK293 세포를 만드는 데 사용됩니다마이크로 주입로투스 바카라 분해는 CCRICS로 시각화되었다 (도 2)
결과적으로, 로투스 바카라는 5 분 이내에 MEF 세포에서 세포질에서 분해되었고, HEK293에서는 유의 한 분해가 관찰되지 않았다 발견 된 세포 내 로투스 바카라 분해 활성이 외래 유전자 발현의 효율과 음의 상관 관계가 있다는 가설을지지하는 것 외에도, 세포의 유형에 따라 다르다는 새로운 개념의 발견은 다른 개념의 발견이다 또한, 유전자 전달에 사용 된 로투스 바카라 (유전자 정보를 인코딩)는 현재 모델 로투스 바카라보다 크고 이동 속도가 느려 세포질에서 체류 시간이 더 길어지면서 (최대 몇 시간) 따라서, 이러한 분해를 제어하면 외래 유전자의 발현 효율이 향상 될 수있다
이를 향후 응용 프로그램에 연결하기 위해 우리는 어떤 분자가 우리가 발견 한 분해 메커니즘을 가지고 있는지를 명확히 할 계획입니다 거기차세대 시퀀서기술 등을 결합하는 동안 진행중인 연구 등은 유전자 요법 및 핵산 약물뿐만 아니라 로투스 바카라 대사와 질병의 관계 에서이 기술을 광범위한 방식으로 개발하는 것을 목표로합니다
국립 선진 산업 과학 기술 연구소 국립 연구 개발 공사
생물 분석 연구 그룹 생물 의학 연구 부서
연구원 사사키 아키라 이메일 : akirasasaki * aistgojp ( @로 변경하고 보내주세요)