게시 및 게시 날짜 : 2013/03/19

인간 바카라 사이트 세포를 살아남을 수있는 프로브를 개발했습니다

-세포 상태 확인 중 효율적인 문화-

포인트

  • Lectin Probe RBC2LCN은 인간 바카라 사이트 세포를 시각화하고 효율적으로 탐지하는 데 사용됩니다
  • 우리는 rbc2lcn이 h 유형 3이라는 유형 O 글리 칸에 결합한다는 것을 발견했습니다
  • 안전한 재생 의학 기술에 적용하여 이식 된 세포에서 종양을 유발하는 잔류 인간 바카라 사이트 세포를 제거하기를 바랍니다

요약

바카라 커뮤니티 (Nomaguchi Ari 회장) (이하 "AIST")줄기 세포 공학 연구 센터[연구 센터 디렉터 Asashima Makoto] 오르간 세대 연구팀 Ito Yumizuru 연구팀 Ito Yumizuru Research 팀, 최고 연구팀, 최고 연구팀, Hirabayashi Jun, 최고 연구팀, Tateno Hiroaki, Science Development, Reagent Development Inistition, Reagent Development Inistition과 공동으로 될 것입니다 (이하는 "Wako Pure Chemical Industries"라고 불리우며 배양 배지에 추가하십시오바카라 사이트 세포바카라 사이트 세포 (이후에 "바카라 사이트 세포"라고 함)를 살아있는 동안프로브RBC2LCN또한, RBC2LCN은 바카라 사이트 세포에서 막 단백질에서 H 형 3 3이라고 불립니다타입 O 설탕 사슬에 결합 할 것임이 밝혀졌습니다

RBC2LCN을 사용하면 고품질 바카라 사이트 세포를 쉽게 구별 할 수 있으며 바카라 사이트 세포의 품질 관리 및 배양 효율이 향상 될 것으로 예상됩니다 바카라 사이트 세포를 사용한 재생 의학의 도전 중 하나는 이식을 위해 생성 된 세포에 남아있는 바카라 사이트 세포가 종양 형성에서 인자가 될 수 있다는 것이다 이 프로브를 사용하여 잔류 바카라 사이트 세포의 시각화 및 제거는 종양 형성을 피하는 데 기여할 것으로 예상됩니다

이 기술에 대한 자세한 내용은 2013 년 3 월 22 일에 카나가와 주 요코하마에서 열리는 일본 재생 의학 협회 제 12 차 총회에서 발표 될 것입니다 또한 미국 저널줄기 세포 번역 의학에서 온라인으로 게시 됨

종양 형성의 위험을 제거하는 기술로 이어질 것으로 예상되는 이미지
RBC2LCN은 종양 형성의 위험을 제거하는 기술로 이어질 것으로 예상됩니다

개발의 사회적 배경

바카라 사이트 세포와 같은 최근 인간줄기 세포를 사용하여 재생 의학에 대한 높은 기대치가 높아지고 품질을 제어하면서 안정적인 대량의 바카라 사이트 셀을 제공하는 시스템을 만드는 것이 중요합니다 바카라 사이트 세포를 배양하는 바카라 사이트 세포 및 다른 세포의 효율적인 동정이 필요하지만, 지금까지는 세포를 염색하기 위해 바카라 사이트 세포를 죽이는 방법만이 있으며, 이들이 살아있는 스테인을 만들 수 있다고해도 민감도가 충분하지 않아 고감도와 바카라 사이트 세포의 품질을 쉽게 결정할 수 있습니다미분식 마커의 개발 매우 바람직했습니다

또한, 바카라 사이트 세포를 구별하여 뉴런 및 망막 세포를 포함한 다양한 세포를 생성하고 세포 요법에 사용하려는 시도가 전 세계적으로 수행되고 있습니다 한편, 이식 된 세포에서 분화 된 미분화 된 바카라 사이트 세포는 종양 형성 인 것으로 알려져있다 이것은 재생 의학에 바카라 사이트 세포를 적용하는 데 큰 장벽이되었으며, 새로운 프로브는 잔류 바카라 사이트 세포를 효율적으로 제거 할 것을 촉구했다

연구 기록

AIST는 줄기 세포의 산업 적용 분야에서 최고 주자가되는 것을 목표로하며, 특히 줄기 세포 분화 기술과 줄기 세포의 표준화에 중점을 둡니다 또한 고밀도는 설탕 체인을 분석하는 새로운 기술입니다Lectin microarray의 적용을 위해 노력하고 있습니다 이러한 기술을 결합하여 기존 항체를 대체하는 우수한 바카라 사이트 세포 염색 프로브를 개발하는 작업을 수행했습니다

이 연구 및 개발은 AIST 및 WAKO Pure Chemical Industries, Ltd에 의해 공동으로 수행되었습니다 NEDO (New Energy and Industrial Gectical Development Organization)와 Wako Pure Chemical Industries (2011-2011-2018-)가 자금을 지원하는 공동 연구

연구 컨텐츠

고밀도 렉틴 어레이를 사용한 분석은 렉틴의 유형 인 RBC2LCN이 바카라 사이트 세포에 특이 적으로 결합하는 프로브이며,이 연구에서, RBC2LCN은 바카라 사이트 세포 및 ES 세포의 생물학적 염색에 효과적이라는 것이 밝혀졌다 도 1은 RBC2LCN을 갖는 바카라 사이트 세포의 생물학적 염색 결과를 보여준다 적색 형광 물질로 표지 된 RBC2LCN을 배양에서 바카라 사이트 세포의 배양 배지에 첨가 할 때, 바카라 사이트 세포를 여전히 살아있는 동안 형광 염색 하였다 이 프로브는 거의 무독성이며 배양 배지에 방치 될 수 있으며, 품질을 지속적으로 제어하면서 바카라 사이트 세포를 배양 할 수 있습니다 이 프로브도 있습니다ES 세포또한 광범위한 줄기 세포의 품질 관리에 살아 있고 사용될 수 있습니다

바카라 사이트 세포의 광 미세한 이미지 스테인드 살아있는
그림 1 : 바카라 사이트 세포의 광학 현미경 이미지 스테인드 살아
적색 형광 물질로 표지 된 RBC2LCN을 배양 배지에 첨가하여 바카라 사이트 세포를 시각화 하였다

우리는 어떤 분자 RBC2LCN이 바카라 사이트 세포에 결합하는지 조사했다 결과적으로 RBC2LCN은입니다Podocarixin(그림 2) 또한, O- 타입 설탕 사슬 중에서 H- 타입 3 (FUCA1-2GALB1-3GALNAC)라는 구조를 인식하는 것으로 밝혀졌습니다 이들은 H 형 3가 새로운 바카라 사이트 세포 마커임을 시사한다

바카라 사이트 세포 검출 RBC2LCN의 개략도
그림 2 RBC2LCN의 도식 다이어그램 바카라 사이트 세포 검출
rbc2lcn은 podocarixin의 mucin-like o glycans (H 형 3)에 결합합니다

바카라 사이트 세포 및차별화 된 셀유세포 분석기를 사용하여 분리 실험을 수행하고, 분화 된 세포 및 바카라 사이트 세포를 분리 하였다 (도 3) 바카라 사이트 세포가 재생 의학에 사용되는 임플란트 세포로 오염 되더라도,이 기술을 바카라 사이트 세포에 적용함으로써 종양 형성을 예방할 수있을 것으로 예상된다

RBC2LCN을 사용한 바카라 사이트 세포 분리 실험의 그림
그림 3 : RBC2LCN을 사용한 바카라 사이트 세포의 분리 실험

RBC2LCN은 대장균을 사용하여 대량 (> 80 mg/L)으로 대량으로 제조 될 수 있기 때문에, 기존의 항체를 대체하는 바카라 사이트 세포를 평가하기위한 새로운 바카라 사이트 세포 프로브로서 비용 관점에서도 예상 될 수있다

미래 계획

우리는 종양 형성이 발생하지 않는지 여부와 같이 RBC2LCN을 사용하여 오염 된 바카라 사이트 세포에서 제거 된 세포 공급원의 안전성을 점검 할 계획이다 업계-아카데미아 정부 협력을 통해 우리는 RBC2LCN을 사용하는 기술을 5 년 후 의료 환경에서 실질적으로 사용하는 것을 목표로합니다 또한, RBC2LCN은 WAKO Pure Chemical Industries보다 일찍 상용화 될 계획입니다


터미널 설명

◆ 바카라 사이트 세포
유도 다 능성 줄기 세포(유도 된 다 능성 줄기 세포) 이 셀은 Yamanaka Shinya 교수와 교토 대학교의 다른 사람들이 개발했으며 4 가지 요소가 있습니다 (Oct3/4,sox2,KLF4,C-MYC4 유전자)를 피부 및 혈액 세포와 같은 세포에 도입하여 생성 할 수있는 세포 신체를 구성하는 모든 세포 유형으로 구별 할 수있는 능력이 있다고 생각됩니다 마우스 바카라 사이트 세포의 확립은 2006 년에보고되었고, 인간 바카라 사이트 세포는 2007 년에 확립되었으며, 수정란을 파괴하여 생산 된 ES 세포보다 윤리적 문제가 적어 전 세계에서 관심을 끌고 다양한 재생 의학에 적용될 것으로 예상됩니다 이 결과, Yamanaka 교수와 다른 사람들은 2012 년에 생리 의학에서 노벨상을 수상했습니다[참조로 돌아 가기]
◆ 프로브
특정 분자 또는 세포를 검출하는 데 사용되는 물질 이번에 발견 된 RBC2LCN은 미분화 된 바카라 사이트 세포 및 ES 세포에 구체적으로 반응하는 프로브입니다[참조로 돌아 가기]
◆ RBC2LCN
그램 음성 박테리아Burkholderia cenocepacia에서 유래 된 렉틴 BC2L-C의 N- 말단 도메인의 재조합 형태 고밀도 렉틴 어레이를 사용한 분석은 미분화 된 바카라 사이트 세포 및 ES 세포와 반응하지만 분화 된 신체 세포 또는 마우스 피더 세포와 전혀 반응하지 않는 렉틴 프로브임을 나타냈다[참조로 돌아 가기]
◆ O 형 설탕 사슬
단백질의 세린 또는 트레오닌 잔기에 결합 된 글리코 단백질의 글리코 실화 사슬 대조적으로, 단백질의 아스파라긴 잔기에 결합 된 당 사슬을 N- 타입 당 사슬이라고한다[참조로 돌아 가기]
◆ 줄기 세포
자체 이외의 특수 세포로 구별 할 수있는 능력이있는 세포와 세포 분열이 발생할 때에도 그 자체와 동일한 특성을 갖는 세포를 생성하는 능력[참조로 돌아 가기]
◆ 미분식 마커
바카라 사이트 세포 및 ES 세포와 같은 미분화 된 세포를 판별하고 평가하기위한 지표Nanog, OCT3/4, SSEA3, SSEA4, TRA-1-60, TRA-1-81 등이 알려져 있습니다[참조로 돌아 가기]
◆ Lectin microarray
Lectins는 특정 부분 글리 칸 구조를 인식하고 결합하는 단백질입니다 식물 유래 렉틴은 고대부터 연구에서 알려져 있고 사용되었지만 많은 렉틴은 동물과 미생물에 존재하며 발달, 분화, 면역, 암 발달 및 감염을 포함한 광범위한 수명 현상에 관여하고 있습니다 렉틴 마이크로 어레이는 유리 슬라이드와 같은 기판에서 평행 한 고체 상으로 제조되는 렉틴의 유형입니다 이것은 대략 글리코 단백질에 첨가 된 글리 칸의 구조를 덮을 수있게한다 세포가 차별화되고 암이되면서, 표면 당 단백질 및 당질 지질의 글리코 실화 구조는 극적으로 변화하며, 최근에 렉틴 어레이를 세포 식별 시스템으로 사용하는 운동이있다 동시에 암 마커 검색 도구로도 매우 유용하며 몇 가지 결과가 게시되었습니다[참조로 돌아 가기]
◆ ES 세포
배아 줄기 세포(배아 줄기 세포) 이들 세포는 배반포 단계에서 내부 세포 질량으로 만들어지며 이론적으로 신체를 구성하는 모든 세포로 구분할 수 있다고한다[참조로 돌아 가기]
◆ Podocarixin
타입 1 막 단백질에는 5 개의 N- 타입 글리코 사 미노 글리 칸 부위와 많은 O- 타입 글리코 사미노 글리 칸 부위가 있습니다 분자량은 55 킬로달 톤 (KDA)으로 계산되지만, 명백한 분자량이 200 kDa 이상에 도달하므로 글리코 실화 된 것으로 제안되었다 원래 신장 사구체 상피 세포 (족 세포)에서 발견 된 단백질이지만, 인간 IP 및 ES 세포에서 고도로 발현되는 것으로 밝혀졌다[참조로 돌아 가기]
◆ 분화 셀
피부 세포 및 심근 세포와 같은 다양한 기관 및 기관을 구성하도록 특수한 세포[참조로 돌아 가기]
◆ 유세포 분석기
일정한 파장의 레이저 표시등을 셀과 같은 작은 물체에 적용하고 물체가 형광을 방출하는지 여부를 선택하는 장치[참조로 돌아 가기]

관련 기사


문의

연락처 양식