바카라 꽁 머니 뇌의 온난화에 대한 새로운 지식

Neurotransmitters는 뉴런 사이의 정보를 전달하는 책임이 있으며 흥분성 글루탐산 및 억제 성 γ- 아미노 부티르산 (GABA)은 대표적인 예라고합니다 뇌는 흥분과 억제 신경 전달을 능숙하게 조절하고, 기억 및 학습과 같은 더 높은 뇌 기능을 유지하며, 글루타메이트 및 GABA와 같은 신경 전달 물질의 행동을 관찰하는 것도 뇌 병리를 밝히는 데 중요합니다

바카라 꽁 머니 뇌에서 신경 전달 물질의 거동을 관찰하기위한 고전적인 기술은 미세 투석 멤브레인이 뇌에 외과 적으로 내장되고 신경 전달 물질을 회복하는 미세 투석 방법 (미세 투석 방법)입니다 미세 투석 방법에서, 뇌에 내장 된 미세 투석 막의 내부에 들어간 신경 전달 물질은 수 μL/분의 낮은 유속으로 외부로부터 관류 유체를 붓함으로써 수집된다 전통적으로, 수집 된 관류에서 신경 전달 물질의 측정이 수행된다액체 크로마토 그래피 및 액체 크로마토 그래피 질량 분석법⁸그리고 그와 같은 것이 사용되었으므로, 측정에 필요한 샘플의 양을 보장하기 위해 15-20 분 동안 관류를 수집해야했습니다 다시 말해, 상기 분석 바카라 꽁 머니을 사용하여,이 제약은 뇌에서 신경 전달 물질의 거동이 15-20 분 간격으로 만 관찰 될 수 있다는 것이었다 또한, 관류의 담수화는 질량 분석법을 수행하는 데 시간이 걸리므로 작업을 복잡하게 만드는 데 문제가있었습니다

반면에, 미세 투석 방법을 사용하여 뇌에서 신경 전달 물질의 거동을 통계적으로 분석하기 위해, 다수의 바카라 꽁 머니를 사용하여 실험을 수행하고, 각 관측 시점에서의 신경 전달 물질의 농도는 시점 사이의 데이터에 대해 평균화되었다통계 분석 (중요한 차이 테스트)⁹しかし本来、単一のマウスからマイクロダイアリシス法で得られた神経伝達物質の濃度変化は「時系列データ」であり、前後のデータ間には자기 상관¹⁰Seable 따라서, 다중 바카라 꽁 머니에서 얻은 시계열 데이터가 평균화되면, 각 바카라 꽁 머니에 대한 시계열 데이터의 경향이 취소되고 더 적절한 분석 방법을 구성해야했습니다

Zaitsu 부교수와 다른 사람들은 2016 년 프로브 전기 분무 이온화 탠덤 질량 분석법 (PESI/MS/MS) (그림 1)에서 연구 그룹을 개발했으며 (그림 1), 뇌 미세 조절 및 추적 샘플의 직접 분석을 달성했습니다 (K Zaitsu* et al, Analytical Chemistry 2016; Y Hayashi, K Zaitsu* et al, Analytica Chimica Acta 2017; K Zaitsu* et al Analytical Chemistry 2018; K Zaitsu* et al Analytical Chemistry 2020; K Hisatsune, K Zaitsu* et al 표적 성분의 이온화는 전처리가 필요하지 않으며, 몇 μL의 샘플 부피만으로 분석을 수행 할 수 있습니다

따라서, 우리는 미세 투석 바카라 꽁 머니에 의해 얻은 관류가 PESI/MS/MS를 사용하여 분석 될 수 있는지 조사했다 관류 용액에 사용 된 인공 뇌척수액 (ACSF)에 글루탐산 및 GABA를 첨가하고, PESI/MS/MS를 사용하여 분석을 수행 하였다 조건 검사의 결과로, 정량 분석 바카라 꽁 머니은도 2에 도시 된 작동 흐름에 따라 구성되었다 (도 2)

시편 당 분석 시간은 30 초 밖에 걸리지 않았으며, 교정 곡선은 글루탐산과 GABA 모두에 대해 양호한 선형성을 나타냈다 또한 며칠 내 및 일에 걸친 정량적 정확도와 재현성이 높다는 것이 밝혀졌습니다 특히,이 바카라 꽁 머니은 단지 3 ㎕의 ACSF를 사용하여 글루탐산 및 GABA 농도의 신속한 측정을 허용한다 이는 미세 투석 관류의 유량이 3 ㎕/분로 설정되면 매분 매분을 수집해야하며 뇌의 글루탐산과 GABA의 농도의 변화는 1 분마다 관찰 될 수 있음을 의미합니다

이 분석 방법의 실용성을 평가했습니다 미세 투석 방법을 사용한 미세 투석막을 갖는 프로브는 외과 적으로 작동함으로써 바카라 꽁 머니의 선조체에 배치되고, CSF 용액이 자유 운동 하에서 일정 시간 동안 관류 된 후, 고농도의 칼륨 이온을 함유하는 관류 용액 (High-K⁺액체)⁸여기서, 관류의 유속을 3 ㎕/분로 설정하고, 관류는 5 분 또는 1 분마다 수집되었고, 측정을 수행 하였다 결과는 그림 3과 4에 나와 있습니다

그림 3 및 4에서 볼 수 있듯이 5 분마다 수집 된 데이터와 1 분마다 수집 된 데이터 모두 High-K⁺관류를 액체로 전환 한 직후 글루탐산 농도의 경향이 증가한 후 농도가 감소했습니다 우리는 또한 글루탐산 농도의 증가보다 GABA 농도가 약간 늦게 증가하는 경향이 관찰되었다

따라서 바카라 꽁 머니 별 바카라 꽁 머니별로 이러한 시계열 데이터를 분석하기 위해 베이지안 통계 모델링을 사용하여 상태 공간 모델을 적용했습니다 여기서, 95% 신뢰 구간은 정상 상태 농도 (그림 3의 0-25 분 및 그림 4의 0-9 분)를 사용하여 상태 공간 모델로부터 계산되었다 이 95% 신용 간격은 각각 그림 3과 4의 블루 밴드로 표시됩니다

그림 3에 표시된 5 분마다 시계열 데이터에서 High-K⁺액체 관류에 의한 탈분극은 글루탐산과 GABA가 95% 신용 간격보다 높다는 것을 보여 주었다 그러나,도 3A-1에 도시 된 바와 같이, 글루탐산은 하나의 바카라 꽁 머니에서 65 분에서 95% 신용 간격보다 낮은 반면,도 3B-1에 도시 된 다른 바카라 꽁 머니는 95% 신용 간격보다 낮지 않았다

반면에,도 4A-1 및 4B-1에 도시 된 분당 시계열 데이터에서, 두 바카라 꽁 머니에서, 글루탐산은 탈분극으로 인해 95% 신용 간격보다 높았으며,이 신용 간격보다 낮다는 것을 확인했다 이것은 매 분마다 수집 된 데이터가 뇌에서 신경 전달 물질의 거동을보다 자세히 관찰 할 수 있음을 보여 주었다

또한 그림 3 및 4에 표시된 모든 바카라 꽁 머니에서 High-K⁺유체의 관류 동안 GABA 농도는 95% 신용 간격보다 계속 높았습니다 따라서,이 기술을 사용하여 선조체에서 글루탐산과 GABA의 흡수 메커니즘의 차이를 자세히 관찰하는 데 사용될 수 있음이 밝혀졌다

결과적으로,이 연구는 1 분마다 자유 운동하에 바카라 꽁 머니에서 뇌의 신경 전달 물질의 거동을 관찰하는 방법을 성공적으로 개발했습니다 또한 베이지안 통계 모델링을 사용하여 미세 투석 방법에서 얻은 시계열 데이터에 처음으로 상태 공간 모델을 성공적으로 적용했으며 실용성을 보여주었습니다

알츠하이머 치매 및 파킨슨 병을 포함한 병리학 적 모델에서 바카라 꽁 머니 분석 에이 방법을 적용하면 각 조건에서 신경 전달 물질의 행동에 대한 더 자세한 추적 관찰이 가능해 질 것으로 예상됩니다 특히, 최근 몇 년 동안 많은 관심을 끌고 약물 반응성을 평가하기 위해 치매 치료 약물의 발달에 치료 효과에 적용될 것으로 예상된다

신경 전달 물질 이외의 다른 것으로 측정 할 구성 요소를 확장 할뿐만 아니라, 우리는 또한 미생물 및 PIS/MS를 연결하여 뇌 분자의 변화를 측정 할 수있는 생체 내 실시간 뇌 측정 시스템을 사용하여 생체 내 실시간 뇌 측정 시스템을 사용하여 초에 뇌 분자의 변화를 관찰 할 수있는 기술을 개발하는 것을 목표로 할 것입니다 (현재)

잡지 이름 :Talanta
종이 제목 : PESI/MS/MS에 의한 바카라 꽁 머니 뇌에서 세포 외 신경 전달 물질의 신속한 정량화 및 R 및 Stan 기반 베이지안 상태 공간 모델을 사용한 종단 데이터 분석
저자 : Daisuke Kawakami^{a, b}, Mitsuki Tsuchiya^a, Tasuku Murata^B, Akira Iguchi^C, Kei Zaitsu^{a, d,*}
제휴 :^aNagoya University 의과 대학의 의학 및 생물 윤리학과, 65 Tsurumai-Cho, Nagoya, 466-8550, Japan
^BShimadzu Corporation, 1, Nishinokyo-Kuwabaracho Nakagyo-Ku, Kyoto, 604-8511, Japan
^C일본의 지질 조사, 국립 고급 산업 과학 기술 연구소 (AIST)
^d생체 내 실시간 OMICS 실험실, 나고야 대학교, 고급 연구 연구소, Nagoya University, Furo-Cho, Chikusa-Ku, Nagoya, 464-8601, Japan
doi :

1 미세 투석 바카라 꽁 머니 (미세 투석 바카라 꽁 머니)

미세 투석 막이있는 프로브가 바카라 꽁 머니의 뇌에 외과 적으로 이식되고 인공 뇌척수액 등이 관류되어 신경 전달 물질과 같은 뇌 분자를 수집하는 방법 그것의 특징은 자유 운동에서 뇌의 분자를 수집하고 뇌에서 그들의 행동을 관찰 할 수 있다는 것입니다[참조로 돌아 가기]

2 프로브 전기 분무 이온화 탠덤 질량 분석법 (PESI/MS/MS)

Probe Electrospray Ionization은 2007 년 Yamanashi University의 Hiraoka Kenzo 교수가 개발 한 이온화 바카라 꽁 머니이며, 700 nm의 팁 직경을 가진 미세한 바늘을 사용하여 샘플 수집 및 이온화를 수행 할 수 있습니다 탠덤 질량 분석법 (MS/MS)은 "4 차 유형"이라는 3 개의 질량 분리기가 질량 분석기의 질량 분리기에 직렬로 연결되는 장치에 의해 수행되는 분석 기술을 나타냅니다 MS/MS는 2 단계 질량 분리를 가능하게하여 이온화 된 표적 성분의 특정 검출을 허용합니다 PESI와 화합물을 식별하는 능력이 높은 탠덤 질량 분석법 (MS/MS)을 결합함으로써 전처리 절차를 수행하지 않고 장기 내에서 관심있는 성분을 직접 검출 할 수 있습니다 2016 년, Zaitsu 부교수와 다른 연구 그룹은 PESI/MS/MS를 사용하여 세계 최초의 대사 산물 분석 바카라 꽁 머니을보고했습니다[참조로 돌아 가기]

3 신경 전달 물질

뉴런의 축삭 말단에서 방출되고 표적 세포의 흥분과 억제를 전달하는 화학 물질 글루탐산은 인기있는 흥분성 신경 전달 물질이며, GABA는 억제 신경 전달 물질로 유명합니다[참조로 돌아 가기]

4 시계열 데이터

특정 시간에 측정을 시간 순서로 배열하여 얻은 데이터를 말합니다 일반적으로 처리되는 데이터와 달리 상호 측정간에 통계적 종속성이 종종 관찰되므로 데이터 분석은 시간 축을 따라 배열되는 순서를 고려합니다[참조로 돌아 가기]

5 베이지안 통계 모델링이있는 상태 공간 모델

베이지안 통계를 기반으로 한 모델링 바카라 꽁 머니 중에서, 이는 향후 어느 시점에서 관측 된 값과 그 변동을 예측하기 위해 상태 및 관찰 방정식을 시계열 데이터에 적용하는 모델을 나타냅니다[참조로 돌아 가기]

6 탈분극

세포막 내부와 외부의 전위차 (막 전위)는 나트륨 이온 또는 다른 물질의 세포로의 유입으로 인해 양성 방향으로 변화합니다[참조로 돌아 가기]

7 선조

그것은 기저핵의 주요 구성 요소 중 하나이며 운동 기능 등에 관여하는 것으로 알려져 있습니다 글루타메이트는 뇌 피질로부터 선조체를 흥분시키기 위해 뇌 피질에서 방출되는 것으로 알려져 있으며, 중간 가시 뉴런, 스트라이어의 90%에 대해 gaba를 사용하는 gaba를 사용하는 gaba를 사용하고, 그리고 gaba를 사용하고, 간접 트랙[참조로 돌아 가기]

8 액체 크로마토 그래피/액체 크로마토 그래피 질량 분석법

이것은 물질 분리 및 분석 바카라 꽁 머니 중 하나이며, 액체가 이동상으로 사용되고 분리 컬럼을 사용하여 관심있는 구성 요소를 분리하는 기술을 액체 크로마토 그래피라고합니다 질량 분석법 이이 액체 크로마토 그래피에 연결되는이 기술을 액체 크로마토 그래피 질량 분석법이라고합니다[참조로 돌아 가기]

9 통계 분석 (중요한 차이 테스트)

두 그룹의 데이터간에 차이가 있는지 통계적으로 테스트합니다 모집단 분포가 정규 분포를 따른다는 가정에서 수행 된 파라 메트릭 테스트 중에서, t- 검정은 두 그룹 간의 테스트를위한 일반적인 바카라 꽁 머니으로 알려져있다 테스트를 반복 할 때 발생하는 "다중 테스트의 문제"도 알려져 있으며, 상당한 차이 테스트를 반복적으로 수행 할 때주의가 필요합니다[참조로 돌아 가기]

10 자기 상관

정규화 된자가 분위기는 시계열 데이터에서 발생하는 관찰 지점 사이의 상관 관계와 유사성을 나타냅니다[참조로 돌아 가기]