국립 연구 연구소 (National Research Institute of Advanced Industrial Science and Technology) (이하 "바카라 사이트 주소")는 생물 의학 연구 그룹의 책임자이며 연구 그룹 인 Noda Naohiro입니다오일 드롭 렛
이 기술은 미바카라 사이트 주소 멤브레인을 만드는 데 사용됩니다막 염색 형광 염료액적 내부에서 자라는 미바카라 사이트 주소을 감지하기 위해 형광 강도를 증가시키기 위해 국소화된다 고정되지 않은 것과 비교할 때, 지수는 매우 민감하고 미바카라 사이트 주소의 수에 의존하여 미바카라 사이트 주소이 증가하는 액 적의 특정 검출 및 회수를 가능하게합니다 "백만 스크린"미바카라 사이트 주소 자원 검색 속도를 높이고 바카라 사이트 주소 제조를 가속화하고 바카라 사이트 주소 경제 사회의 실현에 기여합니다
On Chip Biotechnology Co, Ltd는이 기술에 사용 된 탐지 시약을 상용화하여 10 월 1 일에 판매를 시작할 것입니다
바이오 제조 분야에서 고도로 최적화 된 세포는 생산 공정으로 미바카라 사이트 주소 및 기타 제품에 적용하는 데 사용됩니다 "스마트 셀9086_9169
환경 샘플에서 배양되지 않은 신규 미바카라 사이트 주소을 검색하는 주류 방법은 후보 균주를 한 번씩 한쪽별로 하나씩 분리하는 것입니다 이 병목 현상을 제거하기 위해, 문화 조건을 최적화 할뿐만 아니라 사용 된 균주의 선택 및 육종에 대한 단기적이고 포괄적 인 평가를위한 기술이 필요했습니다 미바카라 사이트 주소 자원 검색의 빠른 검색에 대한 수요를 충족시키기 위해, 액적 기술을 사용한 백만 스크리닝에주의를 기울이고 있습니다
백만 스크리닝은 액 적의 미바카라 사이트 주소을 성장시키고 표적 제품을 감지하기 위해 기술 개발이 필요합니다 세포자가 형광 또는 세포 외 분비와 반응하여 세포가 빛을 방출하는 시약을 사용하여 미바카라 사이트 주소 성장을 검출 할 수 있습니다 그러나,자가 형광의 강도에 따라 검출 감도가 얻어지지 않았으며, 세포 외 분비를 검출하는 방법은 주변 환경에서 가져온 세포 외 물질로 인해 잘못된 양성 및 배경 증가로 인해 문제가되었다
바카라 사이트 주소는 미생물을 사용하여 생물 제조 연구를 촉진하고 있으며 백만 스크리닝을위한 기본 기술을 개발했습니다 이번에는 정교하고 광범위하게 적용 가능한 기본 기술을 개발했으며,이 기술을 개발하여 미생물 막을 구체적으로 염색하여 액 적의 미생물 성장을 감지하는 형광 시약을 사용합니다 이 검출 방법은 배경 상승을 줄이고 감도가 높은 라이브 셀을 캡처합니다
이 연구 및 개발은 국립 연구 개발기구 (NEDO)의 국가 연구 개발 기관, NEDO (National Research and Industrial Andustrice Development Organization)에 의해 국가 연구 및 개발 회사가 의뢰 한 프로젝트 인 "바이오 유래 제품 생산 기술을위한 개발 프로젝트 (일반적으로 바이오 제조 프로젝트라고도 함) (2020-2026)에서 지원합니다
Droplet culture screening technology is the foundation of million screening technology, where microorganisms are cultured in liquid within droplets, and then selectively separate positive droplets based on detection of fluorescence, scattered light, etc This research developed this technology and developed a technology that uses fluorescent reagents that specifically stain microorganism membranes to suppress false positives due to the effects of medium components, and 높은 감도로 미바카라 사이트 주소 성장을 감지합니다 이 새로운 기술은 독성이 거의없는 세포의 직접 염색을 특징으로하여 미바카라 사이트 주소 성장을 직접 검출 할 수 있습니다 또한, 미바카라 사이트 주소의 수가 증가함에 따라, 미바카라 사이트 주소 막의 총량도 증가하여, 막을 염색 할 때 풍부 (숫자)를 색인으로 사용하여 미바카라 사이트 주소을 선택하고 나눌 수있는 새로운 기술이된다
먼저, 오일에서 수상방을 생성하기 위해 마이크로 플로 채널을 사용했습니다 이때, 막에 결합 될 때 형광 강도를 증가시키는 막 염색 시약이 배지와 함께 액적에 캡슐화되었다 이것은 박테리아가 액적 내부에서 자랄 때 형광 강도의 증가가 검출 될 수 있는지 여부를 조사했다 제조 된 액 적을 37 ℃에서 밤새 배양 한 후, 현미경 하에서 관찰 될 때, 대장균에서 성장한 액 적은 강한 형광을 생성하는 것으로 관찰되었다 (도 1)
그림 1 방울 (30 μm)의 형광 현미경 관찰 막 염색 시약 (녹색) 및 대장균으로 밤새 배양되었습니다
(왼쪽 : 다크 필드 현미경 이미지; 오른쪽 : 형광 현미경 이미지) 스케일 바 : 100 µm
다음, 막 염색 시약으로 염색 된 액 적의 미바카라 사이트 주소 검출 및액적 분류기를 사용하여 제품을 수집 할 수 있음이 입증되었습니다 액적 내에서 미바카라 사이트 주소의 존재는 어두운 장을 사용한 미세한 관찰에 의해 확인 될 수 있지만, 미세한 관찰은 많은 방울을 다루기가 어렵고 분리 할 수 없다 막 염색 시약으로 형광 염색은 액적 분리기를 사용한 고속 분류 (형광 강도를 사용한 분류 및 제조)를 가능하게합니다 각 액적의 형광 강도의 측정은 미바카라 사이트 주소이 자란 미바카라 사이트 주소과 액 적을 갖지 않는 액 적을 식별 할 수 있었다 또한, 대장균의 수가 시약을 사용하지 않고 대장균의 수를 감지 할 때 감지하기 어려운 경우에도,자가 형광 단독을 사용하여 검출되면 막 염색 시약을 사용하여 대장균의 존재를 성공적으로 감지 하였다 (도 2) 또한, 미바카라 사이트 주소에 의해 성장한 액 적은 형광 강도에 따라 액적 분산기에 의해 선택적으로 분리 될 수있다 액 적의 90%가 비어 있고 나머지 10%가 대장균을 함유 한 경우, 높은 형광 강도를 갖는 액 적만 수집 될 때, 미바카라 사이트 주소을 함유하는 액 적을 최대 100%의 속도로 회수 할 수있다 (도 3) 배양 또는 분류 과정에서 액 적이 파손되고 크기가 변경 될 수 있지만, 정렬에는 크기의 변화가 포함되면 원하는 액 적을 수집 할 수 있습니다
그림 2 대장균에서 막 염색 시약 (빨간색)의 존재 또는 부재에 기초한 검출 감도 비교
그림 3 막 염색 시약 (빨간색) 및 대장균으로 밤새 배양 된 액 적 (120 µm)의 분류
Light Blue : 빈 액적 (제어 측정) 빨간색 : 대장균 캡슐화 된 액적 스케일 바 : 100 µm
이 기술 과이 시약을 사용하여 미바카라 사이트 주소 성장은 백만 스크리닝에서 간단하고 매우 민감한 방식으로 감지 될 수 있습니다 그것은 미바카라 사이트 주소의 기본 성분 인 막을 염색 할 때 다양한 박테리아 종에 사용될 수 있습니다 따라서 다양한 미바카라 사이트 주소을 포함하여 환경에서 유용한 미바카라 사이트 주소을 탐색하고 번식하기위한 기본 기술로 사용될 수 있습니다 한 가지 예는 물방울에 개별적으로 캡슐화 된 환경에서 다양한 미바카라 사이트 주소을 스크리닝하는 경우입니다 유용한 기능을 갖는 미바카라 사이트 주소 만 자라는 특정 조건 하에서 배양 한 다음, 그러한 조건 하에서 성장한 드문 유용한 미바카라 사이트 주소을 함유하는 액 적을 분류함으로써 얻어진다 분류를 통해 수집 된 액 적은 96- 웰 플레이트로 하나씩 분리 될 수 있으므로 거기에서 많은 양의 재배에 연결될 수 있습니다
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이 시약을 사용하여 응용 프로그램 범위를 확장하고 유용한 응용 프로그램을 개발하는 것 외에도 기술을 더욱 강화하고 개선하기 위해 노력할 것입니다 또한이 탐지 기술을 사용하여 바이오 제조 제품을 제조하기위한 회사의 요청에 따라 문제를 해결하기 위해 협력 할 것입니다
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