국립 선진 산업 과학 기술 연구소 [Yoshikawa Hiroyuki 회장] 바카라 양방 공학 연구 부서 [Miyake Jun 회장] 최고 연구원 Okushi Hajime (연구 그룹 책임자), 조직 및 재생 공학 연구 그룹, Oda Yasuaki 및 기타 사람들은 지혜 이빨을 연구하고 있습니다 (치아 세균) 치아 생식기 원산지중간 엽 바카라 양방IPS 바카라 양방설립되었습니다
Kyoto University의 IPS 바카라 양방 설립 보고서 인 Yamanaka Shinya 교수의보고 후, 이들 바카라 양방의 증식 가능성도 표현된다차별화그 능력이 매우 우수하다는 것이 점점 더 잘 입증되고 있지만 실제 적용, 특히 임상 적용의 알려지지 않은 측면이 많이 있습니다 많은 환자에게 적응하기 위해서는 쉽게 얻어지고 저장할 수있는 IPS 바카라 양방에 인간 바카라 양방를 유도하는 기술을 확립해야했다
이번에는 IPS 바카라 양방를 사용하고 있습니다재생 의학에 실질적으로 사용하는 것이며, 환자의 동의가 얻어졌고 AIST에서 몇 년 동안 냉동 된 치아 세균에서 유래 한 중간 엽 바카라 양방가 해동 된 다음 이들 바카라 양방로 바뀌었다SOX2, OCT3/4, KLF4우리는 유전자를 도입하여 IPS 바카라 양방를 확립하는 데 성공했습니다 (그림 1)
치아 추출 중에 이전에 폐기 된 지혜 치아 치아 생식 조직은 IPS 바카라 양방의 확립의 공급원이며, 이는 광범위한 재생 의학에 사용될 가능성을 나타냅니다
이 기술에 대한 세부 사항은 2008 년 8 월 21 일 도쿄 대학에서 개최 된 나노 바이오 테크놀로지 심포지엄에서 발표되어 재생 의학을 개발하기 위해 발표되었습니다
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그림 1 : 확립 된 IPS의 활성 증식 용량 (동일한 식민지)
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교토 대학교의 야마나 카 교수에 의해 유도 된 다 능성 줄기 바카라 양방 (IPS 바카라 양방)가 확립되면서 재생 의학이 다음 시대에 들어가기 시작했다 초기 IPS 바카라 양방가 암이 발달 할 것이라는 우려가 있습니다myc를 포함하여 4 개의 유전자가 사용되었습니다 이후,myc를 포함하지 않는 3 개의 유전자를 사용하여 생산할 수 있다고보고했습니다 그러나, 인간 바카라 양방를 사용하여 현재 공개 된 IPS 바카라 양방 생산의 대부분이 주목됩니다myc사용됩니다 또한, 많은 바카라 양방는 청소년 및 약한 바카라 양방이며, 대부분은 피부 바카라 양방와 일부 골수 바카라 양방이며, 성인 바카라 양방의 IPS 바카라 양방는 거의보고되지 않습니다
바카라 양방 공급원의 연령 및 유형은 IPS 바카라 양방를 적용 할 때 문제가됩니다 IPS 바카라 양방가 어른으로부터 얻은 조직으로부터 유래되고 폐기 된 경우, IPS 바카라 양방는 생산하기가 더 쉬울뿐만 아니라뱅킹또한 가능합니다 특히, 젊은이들의 조직에서 IPS 바카라 양방를 확립 할 수 있다면, 미래의 질병에 대해 자체 IPS 바카라 양방가 이용 가능할 것입니다 또한,HLA>기타 이식또한 가능합니다 다시 말해, 임상 적용에 대한 IPS 바카라 양방를 실현하기 위해, 적절한 인간 조직을 선택하고이를 사용하여 IPS 바카라 양방를 확립하는 방법을 확립하는 것이 바람직하다
위의 배경을 바탕으로, 우리는 치과 의사에 의해 추출 된 사랑니 (치아 세균)에 초점을 맞추고 치아 세균에서 IP를 확립 할 수 있는지 여부를 조사했습니다
환자의 치아 세균으로부터 유래 된 중간 엽 바카라 양방를 해동하여 중간 엽 바카라 양방를 재배 하였다 성장 바카라 양방에서Oct4, sox2andKLF4유전자는 Lentivirus (도 2)를 사용하여 도입되었고 태아 소 혈청을 사용하여 6 일 동안 배양되었다 그 후, 바카라 양방를 분리하고 마우스 피더 바카라 양방에 시딩 한 다음, B-FGF 단백질을 약 30 일 동안 배지에 첨가하고 약 30 일 동안 배양 하였다식민지감지 될 수 있습니다
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그림 2 치아에서 IPS 설정
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이 식민지는 평평한 모양 (도 3A)을 가지며 (도 3A), 하루가 지나갈 때, 식민지의 중심은 분화 된 바카라 양방로 전환되었다 (도 3B) 많은 식민지들이 식민지를 분산시키고 다른 페트리 접시에서 파종함으로써 며칠 내에 형성되었다 (도 3C) 동일한 절차를 반복적으로 수행함으로써, 10,000 IPS 바카라 양방는 약 17 일 동안 단일 치아 생식기 유래 중간 엽 바카라 양방로부터 25 일에 백만 백만으로부터 얻어졌다 따라서, 이들 바카라 양방는 고도로 증식되고 분화된다 게다가,ES 바카라 양방YA배아 암종 바카라 양방 (EC)에서 발현 된 유전자의 발현 또한 확인할 수 있습니다텔로 머라 제 리버스 전사 효소의 높은 활동 또한 검출되었다 (도 4)
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그림 3 IPS Colony
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그림 4 텔로 머라 제 역전사 효소 활성
DNA는 단계와 같은 방식으로 뻗어 있으며, 효소 활성은 열처리 (열 +)에 의해 비활성화된다
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ES 바카라 양방 에서이 식민지를 더 자주 발현하는 단백질의 경우면역 염색수행되었으며, NANOG, SSEA3 및 TRA-1-60과 같은 단백질은 콜로니에서 미분화 된 바카라 양방를 함유하는 영역에서 검출되었지만, 이들 단백질은 부분화가 시작된 영역에서 검출 될 수 없었다 (도 5의 신호) 이것은 제품이 분화 된 상태를 유지하면서 확산되는 것으로 밝혀졌지만, 부분화는 조건에 따라 시작됩니다 또한, NANOG 및 REX1 유전자의 프로모터 영역의 DNA는 탈 메틸화되는 경향이 있었다 또한 서스펜션 배양을 수행함으로써 많은 볼과 같은 바카라 양방 질량 (Embryoid Body)가 얻어졌다 (도 6) 이들 결과는 치아 세균으로부터 유래 된 중간 엽 바카라 양방가 재 프로그래밍되어 배아 줄기 바카라 양방 (ES 바카라 양방)-유사 바카라 양방로 돌아와서 IPS 바카라 양방를 초래한다는 것을 보여준다
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그림 5 : 미분화 및 분화 된 (Star) 영역에서의 ES 바카라 양방 관련 단백질 발현
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그림 6 Embryoid Body
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위의 내용은 치아 추출 중에 이전에 폐기 된 지혜 치아 치아 생식 조직이 IPS 바카라 양방의 확립의 공급원이며, 광범위한 재생 의학에 사용될 가능성을 나타냅니다
이 기술에 대한 세부 사항은 2008 년 8 월 21 일 도쿄 대학에서 개최 된 나노 바이오 테크놀로지 심포지엄에서 발표되어 재생 의학을 개발하기 위해 발표되었습니다