바카라 커뮤니티 [Nakabachi Ryoji 회장] (이하 "AIST")환경 관리 기술 연구 부서[Research Division Director Tao Hiroaki] Torimura Masaki, Research Group 및 Kim Seibai의 최고 연구원은 매우 높은 밝기와 우수한 실시간 바카라 사이트을 가지고 있습니다bioluminescence인공적으로 효소를 성공적으로 설계하고 개발했습니다 AIST는 실시간 바카라 사이트 플랑크톤 (copepods)의 실시간 바카라 사이트 효소가 작은 분자량을 가지며 강한 실시간 바카라 사이트 강도를 나타낸다는 사실에 대한 연구를 수행하고있다 이번에는copepod, 우리는 가장 일반적인 아미노산을 식별하고 이것을 우리 자신의 고유 한 아이디어 (다중 정렬rule)에 기초한 재 배열에 의해, 기존의 천연 실시간 바카라 사이트 효소와 다른 실시간 바카라 사이트 효소 그룹이 생성되었다 이것은 자연 살아있는 유기체가 가지고있는 천연 실시간 바카라 사이트 효소와 다르기 때문에 이것을 "인공적Bioluminescent Enzyme(인공 루시퍼 라제; ALUC) "ALUC는 알려진 실시간 바카라 사이트 효소보다 최대 100 배 더 밝고 우수한 실시간 바카라 사이트이 있습니다 (Half Life: 20 분)
기존 생물 실시간 바카라 사이트 효소를 사용한 다양한 분석 시스템 (리포터 유전자 분석,2- 하이브릿 분석, 생물학적 영상 등을 사용한 테스트)는 기존의 것과 비교하여 감도 증가, 더 짧은 측정 시간 및 생물학적 조직의 가벼운 전염 측면에서 매우 높은 이점이 있음을 나타냅니다 이번에는 ALUC를 실시간 바카라 사이트 효소로 발전시킴으로써 생명 과학 분야의 기본 연구에 기여할 것으로 예상 될뿐만 아니라, 다양한 진단에 대한 적용 범위를 확장 할 것으로 예상되며, 이전에는 민감성 및 급속도와 같은 문제로 인해 병원과 같은 의학적 진단과 같은 의료 분야에서 고위성 스크리닝과 같은 문제로 인해 포기되었고 이전에는 민감성 및 급속성과 같은 문제로 인해 포기되었으며, 건강 상태의 고급 스크리닝 및 건강 상태의 상태에서 의료 분야의 자체적 지위는 물과 식품에서 내분비 방해 화학 물질의 높은 감도 분석과 같은 분야
또한 이번에는 일부 연구 개발이 AIST 프로젝트 인 "아시아 전략 및 물 프로젝트"(2012-2013)에서 수행되었습니다 이 기술에 대한 자세한 내용은 National Science JournalBioConjugate Chemistry에 온라인으로 게시됩니다
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| Aluc, 이번에 개발 된 인공 생물 실시간 바카라 사이트 효소 |
Shimomura Osamu 박사의 노벨 화학상은 살아있는 유기체의 실시간 바카라 사이트에 대한 일반 대중으로부터 점점 더 영감을 얻었지만 생명 과학, 의료 진단 및 환경 진단과 같은 분야에서 생물 실시간 바카라 사이트을 더 많이 사용하는 추진력도 증가하고 있습니다
생체 분자의 실시간 바카라 사이트 현상으로 크게 나뉘어져 외부 광 에너지 (형광)에 의해 흥분함으로써 빛을 방출하는 것과 화학 반응 에너지 (화학 실시간 바카라 사이트)에 의해 흥분함으로써 빛을 방출하는 것들이 있지만, 형광 측정에는 여기 광원, 광학 필터 등이 필요합니다 또한, 생물학적 화학 실시간 바카라 사이트에서, 화학 실시간 바카라 사이트 효소의 유형, 실시간 바카라 사이트 효소 (예 : 화재 플라이에서 유래 된 실시간 바카라 사이트 효소)는 화학 에너지를 빛으로 변환하는 촉매 분자로 사용되지만 산업적 사용은 밝기 및 실시간 바카라 사이트 보유 측면에서 제한되어있다
실시간 바카라 사이트 라벨링을위한 실시간 바카라 사이트 효소로 널리 사용 된 파이어 플라이에서 유래 한 실시간 바카라 사이트 효소 (Firefly Luciferase; fluc) 및 Renilla에서 유래 한 실시간 바카라 사이트 효소 (RenillaLuciferase; RLUC)는 신호 신뢰성과 장기 측정에 문제가 있으며, 휘도가 약하고 빛나는 신호의 안정성이 부족하기 때문입니다 또한, 기존의 copepod 실시간 바카라 사이트 효소 (GLUC 및 MPLUC1)는 또한 실시간 바카라 사이트 안정성 및 조상 문제로 어려움을 겪었다 이 문제를 극복하기 위해, 우리는 천연 실시간 바카라 사이트 동물에서 발견되는 실시간 바카라 사이트 효소를 사용하는 방법에서 벗어나 최적의 아미노산으로 구성된 인공 생물 실시간 바카라 사이트 효소를 생성하려고 시도했습니다
최근 몇 년 동안 AEST에 의해 발견 된 많은 copepod luminescent 효소 그룹을 사용하여, 우리는 주로 다중 정렬 정보에서 서열을 재구성하여 자주 존재하는 아미노산에 중점을 두어 일련의 인공 생물 실시간 바카라 사이트 효소 그룹을 만듭니다 이 생물 실시간 바카라 사이트 효소 중 일부에서 매우 밝고 우수한 실시간 바카라 사이트 특성을 가진 실시간 바카라 사이트 효소가 발견되었습니다
2011 년부터 AIST는 실시간 바카라 사이트 라벨의 산업적 가치에 중점을두고 있으며 해양 동물 및 실시간 바카라 사이트 메커니즘에서 유래 한 실시간 바카라 사이트 효소에 대한 기본 연구를 수행하고 있습니다 이 연구에서, 우리는 기존의 copepods에서 수집 한 실시간 바카라 사이트 효소의 아미노산 서열을 조사하고 그들의 기능을 재분석함으로써 시작했다
자주 발생하는 아미노산은 긴 진화 과정에서 자연적으로 선택적으로 살아 남았으며, 따라서 열역학적 안정성에 기여하는 것으로 생각된다 실제로, 10 가지가 넘는 유형의 코포 포드에서 효소의 아미노산 서열을 비교할 때, 많은 수의 빈번한 아미노산을 갖는 영역이 있으며, 열역학적으로 안정적인 아미노산 서열을 추출 할 수 있었다 또한, Copepod 효소는 효소의 촉매 반응을 제어하는 2 개의 유사한 영역을 포함하고, 우리는 이러한 유사성을 향상시키기 위해 아미노산 서열을 변형시킴으로써 실시간 바카라 사이트 성능 (윤기 및 안정성)이 상당히 향상된다는 것을 발견했다
이러한 발견에 기초하여, 필수 아미노산을 결합하여 기존 실시간 바카라 사이트 효소와 유의하게 다른 인공 생물 실시간 바카라 사이트 효소 (ALUC) 그룹을 생성 하였다 이들 아미노산 서열은 알려진 실시간 바카라 사이트 효소와 유의하게 다르며, 서열 상 동성은 70% 미만이다 (도 1 좌측) 이 효소는 또한 실시간 바카라 사이트 밝기, 방출 파장, 실시간 바카라 사이트 지속성, 기질 특이성, 내열성 및 세포 외 분비 측면에서 다양한 개성을 갖는다 그리고 이들의 다양성은 분석 및 사용 환경의 목적에 따라 최적의 시스템을 구축하는데 유용했다 특히, 전례없는 초고 밝기와 우수한 실시간 바카라 사이트을 갖는 효소는 민감도와 진단의 높은 처리량을 증가시키는 데 매우 유용했습니다
이번에는 ALUC의 유용성이 실시간 바카라 사이트 표지 분자로서 다음 방법을 사용하여 검증되었다
(1) 실시간 바카라 사이트 효소 유전자가 동물 세포에 도입되고 실시간 바카라 사이트 효소가 동일한 양으로 발현되었을 때, ALUC는 최대 약 100 배 더 밝았으며 (도 1의 오른쪽), 가장 밝은 기존 실시간 바카라 사이트 효소보다 최대 7 배 더 긴 실시간 바카라 사이트 효소를 나타냈다 (Gluc 및 Rluc86-535)
(2) 의학적 진단에서, 질병에 대한 마커 분자 (항원)를 측정하기 위해, 그것을 결합하는 항체는 실시간 바카라 사이트 효소로 생성되고 표지된다 우리는 실시간 바카라 사이트 레이블로서 ALUC를 가진 프로토 타입 항체를 생산했으며 일반적인 목적HRP표지 된 항체와 비교하여, ALUC 표지 된 항체 (3 형)는 약 2 배나 밝았다 (도 2 (a)) 또한, ALUC는 장 파장 배출량의 비율이 높으며, 이는 생물학적 조직 광 투과율 (생체 이미징)에서 HRP보다 우수하다
(3) 사람이 겪고있는 스트레스의 정도를 측정하기 위해 Aluc 및 스트레스 호르몬 (코티솔)하나의 분자 유형 실시간 바카라 사이트 프로브그것은 GLUC를 사용하는 것보다 밝기가 높은 빛을 방출하고 이제 인간 타액에서도 스트레스 호르몬을 측정 할 수 있습니다 (그림 2 (b))
(4) 2- 하이브리드 분석은 화학 물질의 전사 활성 (환경 진단)을 측정하고 단백질 (생명 과학) 간의 상호 작용을 분석하기 위해 사용된다 화학 물질에 전사 활성 또는 단백질 상호 작용이있을 때, 리포터 유전자가 생성되고, 화학 물질의 농도 및 단백질 상호 작용의 강도는 리포터의 실시간 바카라 사이트 강도에 기초하여 정량화된다 (실시간 바카라 사이트 레이블) ALUC는 동일한 조건에서 사용 된 gluc보다 더 높은 밝기에서 방출 된 빛을 사용했습니다 (그림 2 (c))
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| 그림 1 "인공 생물 실시간 바카라 사이트 효소 (ALUC)"및 "기존의 최고 실시간 바카라 사이트 효소" |
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| 그림 2BioAssay |
(a) 항체 라벨로 사용되는 예 유형 1, 2 및 3은 각각 상이한 항체 생산 방법을 갖는 실시간 바카라 사이트 항체를 나타낸다
(b) 단일 분자 생물 실시간 바카라 사이트 프로브의 작동 원리 ALUC를 둘로 나누고 일시적으로 비활성화하십시오 스트레스 호르몬에 의해, Aluc가 원래 모양으로 접을 때 실시간 바카라 사이트 활동이 회복됩니다
(c) 실시간 바카라 사이트 레이블로서 ALUC를 사용한 2- 하이브리드 분석의 예 전사 인자가 활성화되면 리포터가 발현된다 |
이 생물 실시간 바카라 사이트 효소의 발달은 천연 효소가 이전과 같이 발견 될 것이라는 희망을 가져다 줄뿐만 아니라 미래에 필요한 고성능 효소를 만들 수있을 것입니다 실시간 바카라 사이트 효소의 발달에 관한 미래의 문제는 실시간 바카라 사이트 효소의 3 차원 구조를 설명하고, 생물학적 조직의 투명성을 향상시키기위한 방출 파장을 증가시키고, 질량 생산을위한 방법을 개발하는 것을 포함한다 한편, 진단 분야에서 실시간 바카라 사이트 효소의 적용과 관련하여, 여기에 소개 된 예제에 기초하여 3 차원 구조에 기초한 아미노산 변형과 같은 미세 조건을 조정함으로써 실용성이 더욱 개선 될 것으로 예상된다 이를 달성하기 위해 산업 요구를 충족시키는 제품을 공급할 수있는 회사와 공동 연구를 수행 할 것입니다 또한, 주변 기술인 포토 디터 디바이스의 소형화 및 휴대용을 발전시켜 테스트 키트 및 테스트 페이퍼의 사용을 사용하여 더 많은 사람들이 가정 및 광범위한 경우 사용을 포함하여 더 많은 사람들이 쉽고 쉽게 사용할 수 있도록 계속 개발할 것입니다